产品简介
自营品牌 | 货号AC15L012 |
1 mg | 供货周期现货 |
生物产业 |
详细介绍
小麦胚芽凝集素,AF488标记(下文简称“AF488 WAG"),是一种与N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸结合的凝集素,是绿色荧光中最亮的WGA缀合物。WGA与糖缀合物结合,其衍生物和缀合物被广泛用于标记细胞膜和纤维化瘢痕组织,用于荧光成像和分析。WGA的糖结合特异性与β-1,4-GlcNAc-连接残基的序列,即几丁质酶有关。每个单体包含两个相同的非相互作用的结合位点,它们与3或4β-1,4-GlcNAc单元互补。在所检测的单糖中,只有GlcNAc与WGA结合。甘露聚糖不结合,而GalNAc只能弱结合。WGA与含有Galβ(1--4)GlcNAcβ(1--3)重复序列(即聚乳糖胺型聚糖)的大寡糖中的内部GlcNAc残基具有高亲和力结合。N-乙酰神经氨酸只参与与WGA的低亲和力相互作用。WGA表现出了丰富的糖类特异性结合模式,可用于复杂碳水化合物的结构分析。订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
小麦胚芽凝集素,AF488标记 | AC15L012 | 1 mg | 1550 |
运输与保存 蓝冰运输。4℃短期避光保存,有效期3个月;-15℃长期避光保存,有效期12个月。适用仪器
荧光显微镜 | |
激发: | FITC滤波片 |
发射: | FITC滤波片 |
推荐孔板: | 黑色透明 |
使用方法
溶液配制
AF488 WAG储备溶液 (200X)配制
将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中,制成 2 mg/mL 的储备溶液。
【注】:重新配制的储备溶液可在 4℃ 下短期储存,或在 -20℃ 下长期储存。AF488 WAG工作溶液 (1X)配制(1)将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。 【注】:不同细胞系的优化染色浓度可能不同。活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。
操作步骤
活细胞染色
用 HHBS 缓冲液清洗细胞2次。
添加 100 µL AF488 WAG工作溶液。
将细胞与AF488 WAG工作溶液在 37℃ 下孵育 10-30 min。
用 HHBS 缓冲液清洗细胞2次。
使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。
固定细胞染色
在PBS中使用4%的甲醛固定细胞。【注】:对于固定细胞膜染色,建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色,如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。
添加 100 µL AF488 WAG工作溶液。
在室温下用AF488 WAG工作溶液孵育细胞 10-30 min。
用 HHBS 缓冲液清洗细胞2次。
使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。
图示
图 1. 使用AF488 WAG以 5 µg/mL的浓度在活细胞(Hela细胞) 染色 30 min,然后用Hoechst 33342 *超级纯*(货号:AC12L021)染色。最后使用带FITC和DAPI滤波片组的荧光显微镜成像。注意事项
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
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