产品简介

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自营品牌	AP43L014/AP43L015
500 U	现货
生物产业

Recombinant Enterokinase重组肠激酶为采用重组酵母分泌表达的高纯度、高活性的牛肠激酶，适用范围广（4～45℃，pH4.5～9.5），并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。因经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带。本制品不含有非特异性的蛋白酶切活性。

详细介绍

Recombinant Enterokinase重组肠激酶

产品简介
　　肠激酶（Enterokinase）是一种蛋白酶，高度专一性识别天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸（Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，DDDDK）序列，切割赖氨酸羧基端肽键，去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签，释放出目的蛋白。重组肠激酶（Recombinant Enterokinase，rEK）是高纯度纯化的牛肠激酶轻链亚基，它与天然提取的肠激酶具有同样特异的切割酶活性，且切割速率更快。
　　李记生物研发的重组肠激酶，采用重组酵母分泌表达，纯度高、活性高，可以在较宽pH范围（pH4.5～9.5）和温度范围（4～45℃）有效切割，不含其它蛋白酶，并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。
　　重组肠激酶（rEK）被广泛地应用于基因工程产品的开发，例如，作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性切割，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。产品特性见表1。
订购信息 

产品名称	货号	规格	价格
Recombinant Enterokinase 重组肠激酶	AP43L014	500 U	1050
Recombinant Enterokinase 重组肠激酶	AP43L015	1000 U	1800
Recombinant Enterokinase 重组肠激酶	AP43L016	5000 U	6800
Recombinant Enterokinase 重组肠激酶	AP43L017	10 x 5000 U	45000

保存方法
-20℃保存，冰袋运输。质保期12个月
使用方法（参考举例）
1. 反应体系构建，以1000 μL为例，反应体系如下：

融合蛋白	0.5~1 mg(蛋白浓度：0.1~1 mg·mL-1 )
Recombinant Enterokinase重组肠激酶	0.5~2.5 uL(相当于2~10U)
10 x rEK反应缓冲液	100 μL
超纯水	根据需要补充体积到1000 μL

【注】：10× rEK反应缓冲液配方：0.5 M Tris-HCl，pH 8.0（22℃），10 mM CaCl₂，1% Tween-20。
2. 25 ℃过夜酶切，可用SDS-PAGE检测酶切效果。
3.（可选）本品具有高活力的重组肠激酶，切割蛋白使用量少，可不考虑去除。后续如需去除重组肠激酶，可用阴离子交换树脂（eg.DEAE-FF）对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下：平衡缓冲液：25 mM Tris-HCl，pH8.0；洗脱缓冲液：25 mM Tris-HCl ，pH8.0，含100 mM NaCl。
注意事项

样品溶液含有在>2 mM 尿素，或>250 mM NaCl，或>20 mM β-ME，或>0.1% SDS，或>50 mM咪唑条件下，为获得理想的酶切结果，请先将样品透析到1×反应缓冲液中，然后再进行酶切实验。

磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用，少量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切
 
体系内不能存在磷酸盐。

来源（Source）	重组酵母
分子量（Molecular Weight）	理论值25.850 kDa
外观（Appearance）	透明液体
酶浓度（Enzyme Concentration）	4 U/uL
活性定义（Activity Definition）	在37℃，16小时内将0.5 mg的Thioredoxin-NP-27 95%降解为NP-27所需要的酶量定义为1个活性单位(1U) 。
内毒素检测（Endotoxin）	用LAL法测定内毒素含量小于1 EU·μg-1
质量保证（Quality assurance）	经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；本制品中不含有非特异性的蛋白酶切活性。

表1：产品特性
 
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